(выписка из МУ 1.3.1877-04 "Порядок сбора, упаковки, хранения, транспортирования и проведения лабораторного анализа биологического материала от больных (умерших) пациентов с подозрением на тяжелый острый респираторный синдром (ТОРС)")
Все работы по забору, транспортировке и подготовке проб клинического материала должны осуществляться в соответствии с требованиями СП 1.3.1285-03 "Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)", СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности", МУ 1.3.1794-03 "Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами I-II групп патогенности".
Наиболее эффективно обследование методом ПЦР пациентов в первые 2 недели от начала заболевания, соблюдая при этом следующие правила:
- осуществлять забор материала только стерильными одноразовыми инструментами в стерильные одноразовые флаконы, пробирки. Все виды работ проводят в одноразовых медицинских перчатках;
- забор материала должен производиться в пробирки с транспортной средой, предоставляемой фирмой - производителем тест-систем;
- сразу после забора плотно закрывать пробирки, флаконы с клиническим материалом, не касаясь их внутренней поверхности и внутренней поверхности крышек;
- при переносе клинического материала из пробирок, флаконов в новые использовать только отдельные одноразовые стерильные наконечники с аэрозольными барьерами;
- строго соблюдать правила хранения и транспортирования клинических проб. Охлаждающие элементы перед транспортированием клинического материала желательно замораживать при температуре минус 70 °С.
Кровь
Забор материала
|
Для исследования методом ПЦР необходимо использовать плазму крови. Для проведения ИФА с тест-системой "ИФА-АНТИ-SARS-Coe" возможно использование сыворотки или плазмы крови.
Для получения плазмы забор крови производят натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему "Venoject" (с ЭДТА), "Vacuett" (сиреневые крышки - 6% ЭДТА). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносят в одноразовую пластиковую пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:20 или 3,8% раствор цитрата натрия в соотношении 1:9). Гепарин в качестве антикоагулянта использовать нельзя! Пробирку закрывают крышкой и аккуратно переворачивают несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом).
Для получения сыворотки забор крови проводят натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или стеклянную пробирку типа "Vacuett" без антикоагулянта. При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносят в одноразовую стеклянную пробирку.
|
Предобработка проб
|
Проводится в лаборатории ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Свердловской области"
|
Условия хранения материала и предварительно обработанных проб
|
Образцы цельной крови:
- при температуре 2-25 °С - в течение 12 часов - для качественного определения нуклеиновых кислот.
Недопустимо замораживание образцов цельной крови!
|
Условия транспортирования материала и предварительно обработанных проб
|
Транспортирование клинического материала и предобработанных проб осуществляют в специальном контейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом.
Образцы крови: при температуре 2-8 °С - в течение 12 час. - для качественного определения нуклеиновых кислот.
Образцы плазмы и сыворотки: при температуре 2-8 °С - в течение 3 суток. В замороженном виде - в течение 1 суток.
|
Фекалии
Забор материала
|
Используют пробы фекалий массой (объемом) 1-3 г (1-3 мл).
Исследование мазков неинформативно из-за низкого содержания в них возбудителей.
Фекалии забирают из предварительно продезинфицированного горшка или подкладного судна. Пробу в количестве 1 грамма (примерно) отдельным наконечником с аэрозольным барьером или одноразовыми лопатками переносят в специальный стерильный флакон.
|
Предобработка проб
|
Проводится в лабораториях ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Свердловской области"
|
Условия хранения материала и предварительно обработанных проб
|
Образцы нативных фекалий:
при температуре 2-8 °С - в течение 1 суток.
Фекальная суспензия с глицерином:
при температуре минус 20 °С в течение 1 недели;
при температуре минус 70 °С - длительно.
Допускается только однократное замораживание - оттаивание материала.
|
Условия транспортирования материала и предварительно обработанных проб
|
Транспортирование клинического материала и предобработанных проб осуществляют в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами или термосе со льдом:
Образцы нативных фекалий:
при температуре 2-8 °С в течение 6 часов.
Предобработанные пробы: в замороженном виде - в течение 1 суток.
|
Мазки из полости носа
Забор материала
|
Мазки (слизь) берут сухими стерильными тампонами.
Тампон вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем тампон слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа.
После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой. Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращают зонд в течение 10-15 сек., избегая разбрызгивания растворов. Вынимают зонд из раствора, прижимая его к стенке пробирки и, отжав избыток жидкости, удаляют зонд и закрывают пробирку.
|
Предобработка проб
|
Не требуется
|
Условия хранения материала
|
При комнатной температуре - в течение 6 часов;
при температуре - 2-8 °С в течение 1 недели;
при температуре минус 20 °С в течение 1 месяца;
при температуре минус 70 °С - длительно.
Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала.
|
Условия транспортирования материала
|
Транспортирование клинического материала осуществляют в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом:
при температуре 2-8 °С в течение 1 суток;
в замороженном виде - в течение 1 суток.
|
Смывы из полости носа
Забор материала
|
Забор материала проводят в положении больного сидя с отклоненной назад головой. Для получения смыва из полости носа в оба носовых хода поочередно с помощью зонда или одноразового шприца вводят по 3-5 мл теплого изотонического раствора натрия хлорида. Промывную жидкость из обоих носовых ходов собирают через воронку в одну стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного автоклавирования.
|
Предобработка проб
|
Не требуется.
|
Условия хранения материала
|
при температуре 2-8 °С - в течение 6 часов;
при температуре минус 20 °С - в течение 1 недели;
при температуре минус 70 °С - длительно.
Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала.
|
Условия транспортирования материала
|
Транспортирование клинического материала осуществляют в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом:
при температуре 2-8 °С в течение 6 часов;
в замороженном виде - в течение 1 суток.
|
Смывы из ротоглотки
Забор материала
|
Перед забором смывов из ротоглотки проводят предварительное полоскание полости рта водой.
После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 сек.) 8-1 мл изотонического раствора натрия хлорида. Жидкость собирают через воронку в стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного автоклавирования.
|
Предобработка проб
|
Не требуется
|
Условия хранения материала
|
При температуре 2-8 °С - в течение 6 часов;
при температуре минус 20 °С - в течение 1 недели;
при температуре минус 70 °С - длительно.
Допускается только однократное замораживание - оттаивание материала.
|
Условия транспортирования материала
|
Транспортирование клинического материала осуществляют в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом:
при температуре 2-8 °С в течение 6 часов;
в замороженном виде - в течение 1 суток.
|
Мокрота
Забор материала
|
Забор материала осуществляется в количестве не менее 0,5 мл в одноразовые градуированные стерильные флаконы (пробирки) с широким горлом и завинчивающимися крышками объемом не менее 50 мл.
|
Предобработка проб
|
Проводится в лабораториях ФГУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве
|
Условия хранения материала и предварительно обработанных проб
|
При температуре 2-8 °С - в течение 1 суток;
при температуре минус 20 °С - в течение 1 недели;
при температуре минус 70 °С - длительно.
Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала.
|
Условия транспортирования
материала
|
Транспортирование клинического материала осуществляют в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом:
при температуре 2-8 °С в течение 6 часов;
в замороженном виде - в течение 1 суток.
|
Упаковка и транспортирование образцов
1. Все материалы, доставляемые в лабораторию, должны быть последовательно дважды упакованы:
в транспортную емкость (плотно закрывающиеся пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками). Плотно закрытый верхний конец транспортной емкости вместе с крышкой для надежности заклеивают парафинизированным полиэтиленом;
в пластиковый пакет подходящего размера вместе с небольшим количеством адсорбирующего материала (вата). Пластиковый пакет следует заклеить или запаять.
2. Два или более образца одного пациента могут быть упакованы в один пластиковый пакет. Не допускается упаковывать образцы материалов от разных людей в один и тот же пакет.
3. Заклеенные пакеты с образцами помещают внутрь дополнительного пластикового контейнера с завинчивающейся крышкой. Строго дважды упакованные образцы материалов от разных пациентов могут быть транспортированы в одном дополнительном контейнере. В дополнительный контейнер также следует положить некоторое количество адсорбирующего материала.
4. Описание особенностей конкретного образца, полную информацию и добавочные сведения, касающиеся образцов, а также способ транспортирования и название лаборатории назначения приклеивают к наружной стенке дополнительного контейнера.
5. Плотно закрытые пластиковые контейнеры с заклеенными крышками помещают в термоизолирующий контейнер (термос), приспособленный для транспортирования биологических материалов.
6. Термоконтейнеры и термосы укомплектовывают охлаждающими элементами или льдом. Сроки и условия транспортирования упакованных проб клинического материала указаны в таблице (см. выше).
7. Каждую пробу материала сопровождают бланком направления по форме, прикрепленным к наружной стенке контейнера.
8. Транспортирование проб клинического материала в референтную лабораторию (референс-центр) для дальнейшего исследования с целью подтверждения результатов осуществляется нарочным, информированным о правилах доставки материала.
Наименование направляющей медицинской организации
адрес _________________________________
телефон _______________________________
Направление на лабораторное исследование
с целью диагностики ТОРС
№ _____ от _______________
Фамилия, имя, отчество
|
|
Дата, месяц и год рождения
|
|
Домашний адрес
|
|
Предварительный диагноз
|
|
Материал
|
|
Дата и час взятия материала
|
|
Дата и час отправки материала в лабораторию
|
|
Необходимый температурный режим транспортирования
|
|
Дата и час доставки материала в лабораторию
|
|
Дата заболевания
|
|
Результат предварительного исследования (в случае отправки материала на подтверждение)
|
ПЦР фекалии
|
|
|
ПЦР мазки/смывы
|
|
|
ПЦР мокрота
|
|
|
ПЦР плазма
|
|
|
ИФА
|
|
Ф.И.О. ответственного лица ____________________ Подпись ______________
Дата
5. Сбор проб от больных полиомиелитом
Во всех случаях с диагнозом полиомиелита или с подозрением на полиомиелит или с симптомами острого вялого паралича, где диагноз полиомиелита не исключается, для вирусологического исследования берут две пробы фекалий, а для серологического исследования - две пробы сыворотки. В летальных случаях для подтверждения или отклонения диагноза полиомиелита берут пробы секционных материалов.
|
